Leabharlann Baidu技术领域 [0001] 本发明涉及分析化学技术领域，具体是一种苯磺酸改性硅胶提取尿激酶方法。

　　背景技术 [0002] 尿激酶为从健康人尿中分离的，或从人肾组织培养中获得的一种酶蛋白。由分子 量分别为33000(LMW-tcu-PA)和54000(HMW-tcu-PA)两部分所组成。尿激酶直接作用于内源性 纤维蛋白溶解系统，能催化裂解纤溶酶原成纤溶酶，后者不仅能降解纤维蛋白凝块，亦能降 解血循环中的纤维蛋白原、凝血因子Ⅴ和凝血因子Ⅷ等，从而发挥溶栓作用。对新形成的血 栓起效快、效果好。还能提高血管ADP酶活性，抑制ADP诱导的血小板聚集，预防血栓形成。尿 激酶在静脉滴注后 ，患者体内纤溶酶活性显著提升 ；停药几小时 后 ，纤溶酶活性恢复原水 平。 [0003] 现存技术中，尿激酶的分离提取一直是重中之重，也是本发明技术点。

　　1 .一种苯磺酸改性硅胶提取尿激酶方法，其特征是，包括以下步骤： 1）选取合适孔径、合适粒径硅胶硅胶； 2）对选取的硅胶表明上进行表面修饰； 3）用苯磺酸改性表面的硅胶吸附男性尿液中的尿激酶； 4）经过洗脱得到高纯度的尿激酶。 2 .依据权利要求1所述的一种苯磺酸改性硅胶提取尿激酶方法，其特征是，步骤2）中 的硅胶表面键合苯基硅烷键合相，然后在此基础上进行磺化。 3 .依据权利要求1所述的一种苯磺酸改性硅胶提取尿激酶方法，其特征是，步骤2）中 的硅胶表面键合含有苯磺酸基团的硅烷。 4 .依据权利要求2或3所述的一种苯磺酸改性硅胶提取尿激酶方法，其特征是，硅烷 的芳基能够使用PhSi(OR)3或PhSiCH3(OR)2或PhSi(CH3)2OR或PhSiCl3或PhSiCH3Cl2或PhSi (CH3)2Cl2或PhC2H4Cl4O2SSi或C11H17ClO5SSi。 5 .依据权利要求1所述的一种苯磺酸改性硅胶提取尿激酶方法，其特征是，步骤1）中 所选取的硅胶比表面积为400-800m2/g，所述硅胶粒径范围为38-1000um。 6 .依据权利要求2所述的一种苯磺酸改性硅胶提取尿激酶方法，其特征是，磺化所用 的磺化试剂为SO3或H2SO4或发烟硫酸或ClSO2OH。 7 .依据权利要求1～6任一所述的一种苯磺酸改性硅胶提取尿激酶方法，其特征是， 所述硅胶的改性方法，包括以下步骤： 1）在无水条件下 ，用甲 苯或二甲 苯 作为溶剂并 在110℃条件将硅烷与硅胶置于反应器 中 ，反应时间在12h-20h ，反应结束后将反应物置于砂芯漏斗中过滤 ，并 用甲醇将其洗涤干 净后于线）得到的产物在碱性条件下将苯磺酰氯转化为苯磺酸钠，然后在酸性条件 下，将其转化为苯磺酸； 3）将步骤2）得到的产物用水洗涤至pH值为中性，将硅胶用甲醇或者乙醇洗涤后在砂芯 漏斗中抽滤，然后将抽滤产物在真空干燥箱中干燥得到表面苯磺酸化硅胶。 8 .依据权利要求7所述的一种苯磺酸改性硅胶提取尿激酶方法，其特征是，所述表面 苯磺酸化硅胶提取尿激酶的方法如下： 1) 将表面苯磺酸化硅胶置于尿液中吸附尿液24h-120h ，使其充分吸附 ； 2）将步骤1）得到的吸附后硅胶在用50mmol/L氨水进行洗脱，然后将洗脱液在饱和硫酸 铵溶液中条件下沉淀出，得到尿激酶。

　　激酶方法，包括以下步骤：1）选取合适孔径、合适 粒径硅胶硅胶；2）对选取的硅胶表明上进行表面修 饰；3）用苯磺酸改性表面的硅胶吸附男性尿液中 的 尿激酶 ；4）经过算洗脱得到高纯度的 尿激酶。 本发明中提取的尿激酶呈现出特异性吸附 ；选择 性好载样量高 ；提取的 尿激酶具有纯度高 ，提取 方法简便。

　　(71)申请人 青岛邦凯高新技术材料有限公司 地址 266000 山东省青岛市高新区汇智桥 路88号凯丰国际A座807室

　　发明内容 [0004] 本发明的目的是提供一种苯磺酸改性硅胶提取尿激酶方法，以解决上述背景技 术中提出的问题。 [0005] 为实现上述目的，本发明提供如下技术方案： [0006] 一种苯磺酸改性硅胶提取尿激酶方法，包括以下步骤： [0007] 1)选取合适孔径、合适粒径硅胶硅胶； [0008] 2)对选取的硅胶表明上进行表面修饰； [0009] 3)用苯磺酸改性表面的硅胶吸附男性尿液中的尿激酶； [0010] 4)经过算洗脱得到高纯度的尿激酶。 [0011] 进一步的，步骤2)中的硅胶表面键合苯基硅烷键合相，然后在此基础上进行磺化。 [0012] 进一步的，步骤2)中的硅胶表面键合含有苯磺酸基团的硅烷。 [0013] 进一步的 ，硅烷的芳基能够使用PhSi (OR) 3或PhSiCH3 (OR) 2或PhSi (CH3) 2OR或 PhSiCl3或PhSiCH3Cl2或PhSi(CH3)2Cl2或PhC2H4Cl4O2SSi或C11H17ClO5SSi。 [0014] 进一步的，步骤1)中所选取的硅胶比表面积为400-800m2/g，所述硅胶粒径范围为 38-1000um。 [0015] 进一步的，磺化所用的磺化试剂为SO3或H2SO4或发烟硫酸或ClSO2OH。 [0016] 进一步的，所述硅胶的改性方法，包括以下步骤： [0017] 1)在无水条件下，用甲苯或二甲苯作为溶剂并在110℃条件将硅烷与硅胶置于反 应器中 ，反应时间在12h-20h ，反应结束后将反应物置于砂芯漏斗中过滤 ，并 用甲醇将其洗 涤干净后于线)得到的产物在碱性条件下将苯磺酰氯转化为苯磺酸钠，然后在酸性 条件下，将其转化为苯磺酸； [0019] 3)将步骤2)得到的产物用水洗涤至pH值为中性，将硅胶用甲醇或者乙醇洗涤后在