键合硅胶是一类在硅胶(SiO2·xH2O)外表化学键合上特定基团后所构成的一类吸附资料。硅胶具有十分杰出的机械强度、简单操控的孔结构和比外表积、较好的化学稳定性和热稳定性以及专注的外表化学反响等长处。硅胶外表硅原子主要以硅羟基(=Si-OH)和硅氧烷方式存在,如图1-1,其间硅羟基是进行键合的活性官能团。
硅胶外表存在着满足的可反响硅羟基,再加上硅胶自身的许多特色,例如机械强度好,孔结构和外表积易于操控,有较好地化学稳定性等,因而是各种化学键合相抱负的基质资料。现在代表性的键合基团主要有十八烷基、八烷基、氨基、氰基等。
含有氰基、二醇基、氨丙基、磺酸基、三甲基氨丙基的固定相具有较大的极性,它们在大多数情况下作为正相固相萃取和离子交换固相萃取的吸附剂,其间氰基、二醇基、氨丙基键合硅胶在极少数情况下也作为反相吸附剂运用。最常用的是C18键合硅胶。
中性化合物的保存行为取决于固定相烷基链的长度,烷基链长度削减,疏水性减小,利于极性大的成分保存。碳链呈倒伏状,其碳数与疏水性不呈线性正比,烷基化后,硅醇基与化合物之间的氢键难以构成,效果力以范德华力尤其是色散力(亲和力)为主,因而水的洗脱才能最弱。
十八烷基(C18)的烷基掩盖在颗粒外表,构成疏水性界面,因而很难表现氢键吸附,如成分能进入这层界面才与硅醇基吸附,但易成为不可逆吸附。在洗脱时一般都会选用含有水的极性活动相,如甲醇-水、乙腈-水等。
因为键合反响的要素,不一样的品牌的C18填料的色谱行为并不完全一致,同一品牌填料柱的色谱也会有细小差异(各次的反响率间会有弱小差异)。八烷基(C8)的烷基掩盖在颗粒外表,构成疏水性界面,但其色散力(亲和力)比较更弱,可别离极性更大的化合物。
亲水性C18填料可以正常的运用100%水溶液作为活动相,并对酸性和碱性化合物具有优异才能的别离功能,为极性化合物供给了杰出的保存与别离选择性。
氨基键合硅胶:主要是氢键、色散力及离子效果力,既可作反相色谱亦可用于正相色谱,一般适用于弱酸性、强极性化合物,例如核苷酸、糖类化合物的别离等。因为氨基键合硅胶稳定性差,简单水解掉落,且可构成死吸附,因而惯例运用的寿数一般较短。
反向:多了氢键效果,用于多糖(在运用氨基键合相进行单糖和多糖的别离时,可以有显着效果地的提高端基差向异构体的转化功率,然后防止因为非对映体互变而构成的双峰,然后在别离糖的过程中可以构成更好的峰型。)
正相层析中,腈基键合相的别离选择性与硅胶类似,但极性比硅胶相对较弱,许多在硅胶上别离的物质可用氰基键合相完结,它的长处是不可逆化学吸附相对较少,可运用如正己烷的低极性活动相;
反相层析中,因为其特别的色散力,对双键异构体或含有不等量双键数的化合物有更好的别离效果,可运用甲醇或水的强极性活动相。
二醇柱:主要是氢键、色散力,二醇基键合相是一种非离子型键合相,具有必定的氢键效果,一般是由缩甘油氧丙基硅烷键合相的水解产品,对有机酸和某些共聚物能取得较好别离,也适合于某些蛋白质的水系体积排挤色谱。
郭志谋,张秀莉,徐青,梁鑫淼.亲水效果色谱固定相及其在中药别离中的使用[J].色谱,2009,27(05):675-681.
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